【文章導讀】共聚焦顯微鏡【5F】:共聚焦顯微鏡是一種利用逐點(diǎn)照明和空間針孔調制來(lái)去除樣品非焦點(diǎn)平面的散射光的光學(xué)成像手段,相比于傳統成像方法可以提高光學(xué)分辨率和視覺(jué)對比度。 基本
共聚焦顯微鏡【5F】:共聚焦顯微鏡是一種利用逐點(diǎn)照明和空間針孔調制來(lái)去除樣品非焦點(diǎn)平面的散射光的光學(xué)成像手段,相比于傳統成像方法可以提高光學(xué)分辨率和視覺(jué)對比度。
基本原理
從一個(gè)點(diǎn)光源發(fā)射的探測光通過(guò)透鏡聚焦到被觀(guān)測物體上,如果物體恰在焦點(diǎn)上,那么反射光通過(guò)原透鏡應當匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡(jiǎn)稱(chēng)共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(dichroic mirror),將已經(jīng)通過(guò)透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點(diǎn)上有一個(gè)帶有針孔(Pinhole),小孔就位于焦點(diǎn)處,擋板后面是一個(gè)光電倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探測光焦點(diǎn)前后的反射光通過(guò)這一套共焦系統,必不能聚焦到小孔上,會(huì )被擋板擋住。于是光度計測量的就是焦點(diǎn)處的反射光強度。其意義是:通過(guò)移動(dòng)透鏡系統可以對一個(gè)半透明的物體進(jìn)行三維掃描。這樣的構想,是在1953年, 美國學(xué)者馬文·明斯基提出,經(jīng)過(guò)了30年的發(fā)展,才利用激光為光源,發(fā)展出符合馬文·明斯基理想的共聚焦顯微鏡。
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